Η τεχνική της δοκιμασίας ανοσοαπορρόφησης ενζύμου-στα αγγλικά Enzyme-Linked Immuno Assay-ή δοκιμή ELISA είναι μια ανοσολογική δοκιμή που επιτρέπει την ανίχνευση ή τον προσδιορισμό μορίων σε ένα βιολογικό δείγμα. Σχεδιάστηκε και αναπτύχθηκε από δύο Σουηδούς επιστήμονες, τον Peter Perlmann και την Eva Engvall στο Πανεπιστήμιο της Στοκχόλμης το 1971.

Τα μόρια που εξετάστηκαν με τη μέθοδο ELISA είναι γενικά πρωτεΐνες. Και οι τύποι δειγμάτων περιλαμβάνουν ρευστά βιολογικά υλικά -πλάσμα, ορό, ούρα, ιδρωτικά -, μέσα κυτταρικής καλλιέργειας ή ανασυνδυασμένη πρωτεΐνη -πρωτεΐνη που παράγεται από ένα κύτταρο του οποίου το γενετικό υλικό έχει τροποποιηθεί με γενετικό ανασυνδυασμό -καθαρίζεται σε διάλυμα.

Το τεστ ELISA χρησιμοποιείται κυρίως στην ανοσολογία για τον εντοπισμό και / ή τη μέτρηση της παρουσίας πρωτεϊνών, αντισωμάτων ή αντιγόνων σε ένα δείγμα. Αυτή η ορολογική δοκιμή ανιχνεύει συγκεκριμένα τα αντισώματα που παράγονται από το σώμα ως απόκριση σε ιογενή μόλυνση.

Η χρήση αντισωμάτων για τη διάγνωση μολυσματικών ασθενειών αντιπροσωπεύει μια συγκεκριμένη και γρήγορη μέθοδο. Η τεχνική ELISA είναι μια ανοσοενζυματική τεχνική που καθιστά δυνατή την απεικόνιση, από βιολογικό δείγμα, των αντιδράσεων μεταξύ ενός αντιγόνου-ενός σώματος που θεωρείται ξένο από τον ζωντανό οργανισμό-και ενός αντισώματος που χρησιμοποιεί μια χρωματική αντίδραση που παράγεται από έναν δείκτη ενζύμου- γενικά αλκαλική φωσφατάση και υπεροξειδάση - προηγουμένως συνδεδεμένα με το αντίσωμα. Η χρωματική αντίδραση επιβεβαιώνει την ταυτοποίηση του απομονωμένου βακτηρίου ή την παρουσία του επιθυμητού ιού και η ένταση του χρώματος δίνει μια ένδειξη της ποσότητας αντιγόνων ή αντισωμάτων στο δεδομένο δείγμα.

Υπάρχουν τέσσερις κύριοι τύποι δοκιμών ELISA:

• ELISA απευθείας, καθιστά δυνατή την ανίχνευση ή τη μέτρηση αντισωμάτων. Χρησιμοποιεί μόνο ένα πρωτογενές αντίσωμα.
• ELISA έμμεση, το πιο ευρέως χρησιμοποιούμενο, καθιστά επίσης δυνατή την ανίχνευση ή τον προσδιορισμό αντισωμάτων. Χρησιμοποιεί ένα δευτερεύον αντίσωμα που του δίνει καλύτερη ευαισθησία από την άμεση ELISA.
• ELISA σε ανταγωνισμό, επιτρέπει τη δοσολογία αντιγόνων. Παράγεται από ανταγωνισμό για ομόλογα, δεν χρησιμοποιεί ένζυμο.
• ELISA «σε σάντουιτς», επιτρέπει τη δοσολογία αντιγόνων. Αυτή η τεχνική χρησιμοποιείται συνήθως στην έρευνα.

Το τεστ ELISA χρησιμοποιείται για:

• Βρείτε και μετρήστε αντισώματα στην ορολογία για τη διάγνωση μολυσματικών ασθενειών: ιολογία, παρασιτολογία, βακτηριολογία κ.λπ.
• Πρωτεΐνες δόσης σε χαμηλές συγκεντρώσεις: ειδικές δοσολογίες ορισμένων πρωτεϊνών πλάσματος (ανοσοσφαιρίνη Ε (IgE), φερριτίνη, πρωτεϊνικές ορμόνες κ.λπ.), δείκτες όγκων κ.λπ.
• Δόση μικρών μορίων: στεροειδείς ορμόνες, θυρεοειδικές ορμόνες, φάρμακα…

Το τεστ ELISA χρησιμοποιείται κυρίως για τη διάγνωση πολλών μολυσματικών ασθενειών:

Σεξουαλικώς μεταδιδόμενα νοσήματα (ΣΜΝ)

Συμπεριλαμβανομένης της ηπατίτιδας, της σύφιλης, των χλαμυδίων και του HIV. Συνιστάται από τις υγειονομικές αρχές, είναι το κύριο τεστ ανίχνευσης του AIDS: δείχνει την παρουσία αντισωμάτων κατά του HIV και του αντιγόνου p24 έξι εβδομάδες μετά τη μόλυνση.

Περιφερειακές ή ενδημικές ασθένειες

Κίτρινος πυρετός, ασθένεια ιού Marburg (MVM), Ladengue, νόσος Lyme, Chikungunya, πυρετός της κοιλάδας Rift, Έμπολα, πυρετός Lassa κ.λπ.

Ο Covid-19

Για να διεξαχθεί περισσότερο από 2 έως 3 εβδομάδες μετά την εμφάνιση των συμπτωμάτων, η δοκιμή ELISA καθιστά δυνατή την αναγνώριση, σε λιγότερο από μία ώρα, της παρουσίας αντισωμάτων κατά του SARS-CoV-2.

Ιογενείς παθογόνοι παράγοντες που προκαλούν προγεννητικές λοιμώξεις

Τοξοπλάσμωση, ερυθρά, κυτταρομεγαλοϊός, απλός έρπης για παράδειγμα.

Άλλες περιπτώσεις

Αλλά έχει επίσης βρει εφαρμογές στον εντοπισμό:

• Εγκυμοσύνες;
• Αυτοάνοσες ασθένειες.
• Τροφικά αλλεργιογόνα: ο ποσοτικός προσδιορισμός των συνολικών ανοσοσφαιρινών Ε (IgE) βοηθά στην εκτίμηση και θεραπεία των αλλεργιών.
• Ορμονικές διαταραχές.
• Όγκοι δείκτες?
• Φυτικοί ιοί.
• Και πολλά άλλα

Στο πλαίσιο της ανίχνευσης αντισωμάτων κατά του SARS-CoV-2, μια πιλοτική μελέτη που πραγματοποιήθηκε τον Αύγουστο του 2020 από το Institut Pasteur, το CNRS, το Inserm και το Πανεπιστήμιο του Παρισιού επιβεβαιώνει την αξιοπιστία της δοκιμής ELISA: και οι δύο δοκιμές ELISA δοκιμάστηκαν για χρήση ολόκληρη η πρωτεΐνη Ν του SARS-CoV-2 (ELISA N) ή η εξωκυτταρική περιοχή της ακμής του ιού (S) ως αντιγόνα στόχων. Αυτή η τεχνική θα επέτρεπε τον εντοπισμό αντισωμάτων σε περισσότερο από το 90% των περιπτώσεων, με πολύ χαμηλό ποσοστό ψευδώς θετικού 1%.

Οι δοκιμές Elisa που διεξάγονται σε εργαστήρια ανάλυσης με ιατρική συνταγή κοστίζουν περίπου 10 ευρώ και αποζημιώνονται στο 100% από την Ασφάλιση Υγείας.

Πραγματοποιούνται σε δωρεάν κέντρα πληροφόρησης, διαλογής και διαγνωστικού ελέγχου (CeGIDD), μπορούν να είναι δωρεάν για τον HIV και τον SARS-CoV-2.